Evaluación de las condiciones de cultivo que incrementan la producción de surfactinas en cepas de Bacillus

Name: Evaluación de las condiciones de cultivo que incrementan la producción de surfactinas en cepas de Bacillus
Keywords: Bacillus subtilis

Datos de investigación

Evaluación de las condiciones de cultivo que incrementan la producción de surfactinas en cepas de Bacillus

Autores: Basso, Vanesa del Rosario Icon

; Jofré, Edgardo Icon

Colaboradores: Medeot, Daniela Beatriz Icon

; Puche, Ricardo Andres Icon

; BAZÁN, CANDELA FLORENCIA Icon

; Ferrari, Walter Antonio Oscar Icon

Publicador: Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas

Fecha de depósito: 31/03/2025

Fecha de recolección: 2023/2025

Clasificación temática:

Biología Celular, Microbiología

Resumen

Los lipopéptidos cíclicos (LPCs) son metabolitos bioactivos sintetizados por bacterias del grupo Bacillus subtilis, algunos de los cuales poseen actividades antifúngicas, antibacterianas, antivirales y antitumorales. Existen diferentes familias de estos compuestos, entre ellas, las surfactinas (Srf), las cuales son sintetizadas por cepas de Bacillus aisladas de suelos salinos de Córdoba. Estas cepas son Bacillus velezensis MEP218 y A6, Bacillus amyloliquefaciens ARP23 y Bacillus subtilis A7. De este modo, se evaluaron diferentes condiciones de cultivo para las cuatro cepas de Bacillus con la finalidad de seleccionar y fijar la condición más propicia para la producción de surfactinas.

Métodos

Cada cepa fue cultivada en diferentes condiciones de transferencia de oxígeno utilizando el 10% y 50% de volumen de llenado con medio MOLP (medio óptimo para la producción de LPCs) o MMOLP (medio modificado derivado de MOLP), distintas temperaturas de incubación (30 y 37ºC) y distintos tiempos de cultivo (48 y 72 h) en agitación a 150 rpm. De cada una de las condiciones de cultivo, se determinó el rendimiento del cultivo (número de células totales UFC/ml y número de esporas/ml) mediante el recuento en placa. Para determinar las UFC/ml a partir de endosporas, diluciones de cada cultivo se incubaron previamente a 80 °C durante 15 min para inactivar a las células vegetativas y luego hacer el recuento de esporas. A su vez, se tomó un volumen de 20 ml de cada cultivo para realizar la purificación de Srf. Para ello, sobrenadantes libres de células provenientes de cultivos de las cepas fueron sometidos a precipitación ácida con HCl a pH=2. El sobrenadante acidificado se centrifugó y el precipitado conteniendo los LPCs (y las Srf) se solubilizó en MeOH obteniéndose un extracto enriquecido en LPCs. Finalmente, los LPCs se inyectaron en un equipo de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) (Infinity LC Grad, Agilent) equipado con una columna C18 (Analítica Zorbax C18, 4,6 mm × 150 mm, Agilent). Las Srf totales eluyeron entre los 49 y 64 minutos y los perfiles cromatográficos emitidos por el software se utilizaron para calcular el área de los picos correspondientes a las Srf. A partir del área de las Srf totales, se calculó la concentración estimada mediante una curva de calibración construida con concentraciones conocidas de un stock de Srf y sus correspondientes áreas cromatográficas.

Palabras clave: Bacillus subtilis, Lipopéptidos cíclicos, Surfactinas

Alcance geográfico

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Identificador del recurso

URI: http://hdl.handle.net/11336/257690

Colecciones

Datos de Investigación (INBIAS)
Datos de Investigación de INSTITUTO DE BIOTECNOLOGIA AMBIENTAL Y SALUD

Citación

Basso, Vanesa del Rosario; Jofré, Edgardo; (2025): Evaluación de las condiciones de cultivo que incrementan la producción de surfactinas en cepas de Bacillus. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. (dataset). http://hdl.handle.net/11336/257690

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